Sí, importa mucho. Cuando separas las claras de huevo, es para batirlas en una espuma. Esta espuma es una espuma basada en proteínas, que depende de que los extremos de las proteínas se enganchen entre sí. Incluso pequeños rastros de grasa evitarán que se forme la espuma. Las yemas de huevo contienen grandes cantidades de grasa. Una vez que una yema de huevo se rompe en las claras, hay que empezar la separación de nuevo, porque puede evitar que se forme la espuma. Además, no utilices cuencos de plástico para batir las claras (su superficie retiene algunas moléculas de grasa incluso después de lavarlas, lo que hace que la espuma sea menos estable) y bate sólo con un batidor o un accesorio para mezclar limpio (no uno que hayas usado sólo para otra cosa, ni siquiera si lo has limpiado).
Para evitar grandes contratiempos, simplemente separa cada huevo nuevo en una taza de té y sólo añade la nueva clara a las claras viejas después de que se haya separado limpiamente. De lo contrario, estarás en un gran problema si separas mucho y el último huevo contamina las claras enteras con la yema. Y un solo huevo contaminado es fácilmente reutilizable para un rápido sándwich de huevo y feta u otra cosa.
La contaminación al revés no es tan preocupante. Aún así, hay que trabajar con la mayor precisión posible, ya que las recetas de sólo yema suelen tener una textura algo peor si se incluye la clara de huevo, pero las pequeñas cantidades contaminantes no suelen ser perceptibles en el producto final, ni siquiera en las espumas (zabaglione, mayonesa). Esto se debe a que las espumas de yema son a base de grasa, y pequeñas cantidades de proteína no evitan que se forme una espuma de grasa.